Микроскоп сверхвысокого разрешения Nikon N-STORM
(495) 223-40-00 | systems@tokyo-boeki.ru
Новый микроскоп сверхвысокого разрешения Nikon N-STORM дает возможность исследовать структуру и функции живых клеток на наноуровне.
Разрешение традиционных оптических микроскопов, даже оснащенных объективами с высокой числовой апертурой, ограничено дифракцией и составляет не более 200 нм.
Микроскоп N-STORM использует временное разрешения для увеличения пространственного разрешения, что позволяет достичь разрешения порядка 20 нм, что в 10 и более раз превышает способность обычных оптических микроскопов.
С использованием микроскопии стохастической оптической реконструкции (STORM) стало возможным исследовать взаимодействие между белками на молекулярном уровне.
Система N-STORM существенно повышает возможность решения задач в области наноскопии и придает уверенность в правильности выводов, которые можно сделать на основе полученных данных.
Микротрубочка, меченая флуоресцентным красителем
Микроскопия стохастической оптической реконструкции (STORM) позволяет реконструировать флуоресцентное изображение со сверхвысоким разрешением при помощи объединения информации о точной локализации каждого флуорофора в образце. В микроскопе N-STORM применяется высокоточная многоканальная молекулярная локализация и реконструкция, используя преимущества мощного инвертированного микроскопа, что позволяет получить сверхвысокое разрешение, превышающее в 10 раз (приблизительно 20 нм в горизонтальной плоскости) разрешение обычных световых микроскопов.
Микроскоп N-STORM использует высокоточную информацию о локализации (двумерную или трехмерную) от нескольких тысяч отдельных молекул-флуорофоров в образце - это позволяет создавать удивительные изображения со сверхвысоким разрешением.
Помимо латерального сверхвысокого разрешения, N-STORM использует патентованные методы для достижения 10-кратного улучшения аксиального разрешения, предоставляя трехмерную информацию в наноскопическом масштабе.
Одноцветное STORM-изображение клатриновых впадин в клетке млекопитающего, меченной Cy3-Alexa647. Объектив: CFI Apo TIRF 100x oil (NA 1,49)
Возможна комбинация с системой N-SIM на одном инвертированном микроскопе Ti.
Получение многоцветных изображений со сверхвысоким разрешением возможно благодаря комбинированию различных зондов - "активаторов" и "репортеров".
Таким образом, становится возможным получение важной информации о колокализации и взаимодействии многочисленных белков на молекулярном уровне.
Принцип работы N-STORM (микроскопия стохастической оптической реконструкции)При микроскопии стохастической оптической реконструкции (STORM) изображение сверхвысокого разрешения реконструируется путем сбора высокоточной информации о локализации каждого флуорофора в трех измерениях и различных цветах. В N-STORM используется стохастическая активация относительно небольшого количества молекул флуорофора с использованием очень малоинтенсивного света. Эта малоинтенсивная стохастическая "активация" отдельных молекул позволяет достичь высокоточного определения положения каждой молекулы в горизонтальной плоскости.
Кроме того, используя преимущество искусственного астигматизма, полученного посредством специальной оптики 3D-STORM, N-STORM локализует каждую молекулу в вертикальной плоскости. Комбинирование путем вычислений молекулярных координат в трех измерениях приводит к получению высококонтрастных трехмерных изображений.
Специализированные флуоресцентные красители
При работе с N-STORM используются пары специализированных флуоресцентных красителей содержащие "активатор" (возбуждение в относительно коротковолновой области спектра) и "репортер" (возбуждение в сравнительно длинноволновой области спектра), что позволяет получить различные цветовые комбинации, упрощая достижение истинного многоканального сверхвысокого разрешения.
Краситель для N-STORM состоит из красителя с наименьшей длиной волны для активации и красителя с наибольшей длиной волны для получения изображений. Создание двух цветных изображений сверхвысокого разрешения возможно только с парами красителей.
| Разрешение по XY | Приблизительно 20 нм |
| Разрешение по оси Z | Приблизительно 50 нм |
| Скорость захвата изображения | 10 минут или более |
| Режим получения изображений | TIRF-STORM 3D STORM |
| Многоцветные изображения | 2 цвета одновременно |
| Совместимый лазер | 405 нм, 457 нм, 561 нм, 647 нм, LU-NV |
| Совместимые микроскопы | Моторизованный инвертированный микроскоп ECLIPSE Ti-E Система «идеального фокуса» Perfect Focus System Кодированный моторизированный XY стол Пьезо -столик |
| Объективы: | CFI Apo TIRF 100x oil (NA 1,49) CFI Plan Apo VC 100x oil (NA 1,40) CFI SR Apo TIRF 100xH (NA 1,49) |
| Камера | Andor Technology iXon DU897 EMCCD |
| Программное обеспечение | NIS-Elements AR/NIS-Elements C (с конфокальным микроскопом A1) |
| Рекомендуемые условия | от 20°C до 25°С (± 0.5 °C) |
